怎么样才能写好一份创业计划书? -凯发官网首页
浙江工业大学4a文化传媒团队
大学生免费复印
创业计划书
项目名称:大学生免费复印
项目单位:浙江工业大学××文化传媒团队
指导老师:××
地 址 :浙江工业大学朝晖校区
电 话 :××××××××
电子邮件:
联 系 人:×××
二零零八年三月
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第一章 执行总结
1.1. 公司
4a文化传媒有限责任公司是一个提议中的公司,以环保、便利为业务立足点的创意文化公司,公司的主营业务是把背面印有商家广告的复印纸配送到指定的各大高校内的复印店为在校学生进行免费复印,以这种极具亮点新意的广告形式为广告主提供一个新的广告传播平台,并从中获取广告费作为公司的利润来源。
这种形式充分利用大学生日常大量复印中浪费掉的背面进行广告的投放。一方面减少传单的投放,进而减少传单对社会环境的污染;另一方面,也节约了大量的纸张,最终会为我国的生态事业做出贡献。这也是商家对品牌进行校园推广的一种全新有效的模式。在如今传单泛滥、人们漠视的情况下,有这样一种高格调的能让广告与同学们自身需要的内容紧密联系、并能够永存的广告形式,宣传爱心和谐环保节约的理念!并帮助大学生成长,最终反哺企业!
公司注重短期目标与长远战略的结合,在未来3年成为浙江省最大,8年成为全国最大的 “免费复印”业务文化传媒公司。
1.2. 市场
根据《2007中国大学生消费与生活形态研究报告》,大学生年均消费超万元。全国大学生平均消费支出总额已达1800亿元。越来越多的商家看到巨大的学生市场容量,希望通过一定的宣传手段进入学生市场,特别是很多针对学生市场的产品,如电脑、手机、数码产品、饮料、运动休闲和培训机构等。而目前的几种宣传手段,如传单、杂志和讲座等,都不是十分理想。
另外一方面,大学生一年需要用到大量的复印纸,根据我们的调查,每人平均用30~60张。由于学生每次的复印量不大,复印店对找零钱的事烦恼。根据我们对复印店的走访,在我们提供每张纸0.04~0.06元/张补偿时,复印店愿意提供学生免费复印。
免费复印这种形式具有成本低、广告价值高、环保节约,无疑为商家进入学生市场提供了极大的便利,具有巨大的市场潜力。
公司采用依量定价的策略进入市场。服务成本水印黑白约0.10元/张,水印彩色约为0.15元/张,水印黑白广告定价0.25元/张,水印彩色广告定价为0.30元/张。
公司将在全国设立市办事处、省办事处和全国办事处,建立健全的营销网络。
1.3.投资与财务
公司成立初期共需资金50万。其中风险投资33万,五位创业团队成员共出资17万元。
股本规模及结构暂定为:公司注册资本50万。外来风险投资入33万(66.00%);五位创业团队成员资金入股17万(占34.00%)。
财务分析如表所示:
财务净现值npv | 4965603元 |
年平均销售利润率 | 31.76% |
净资产收益率 | 75.50% |
静态投资回收期(含建设期) | 一年零十一个月 |
内含报酬率irr | 107% |
从上面可以看出,公司一旦成功运营将具有明显的经济优势,能创造可观的经济效益,因此公司具有很强的竞争力和抗风险能力,前景相当广阔。
风险资金最好在第2—4年撤出,采用收购方式比较适合本公司。
1.4.组织与人力资源
公司性质是有限责任公司,实行总经理负责制。总经理下设市场部、广告设计部、财务部和人力资源部。
创业小组成员将参与公司的市场的管理;公司还聘请了浙江工业大学经贸学院×××老师作为公司顾问。
第二章 项目背景
2.1.中国广告行业背景
近几年,我国广告业发展迅速。2006年中国广告市场花费总额为2875亿元人民币,较2005年增长18%。2007年中国广告市场花费总额达3450亿元人民币,较2006年增长了20%(如图所示)。其中化妆品、浴室用品行业继续稳坐广告投放老大的宝座,而药品、商业及服务性行业、食品、饮料分别排名第二到第五。饮料业获得55%的增幅,成为广告投放增速最大的行业。
2.2.服务概述
2.2.1免费复印
把背面印有商家广告的复印纸配送到指定的各大高校内的复印店为在校学生进行免费复印,以这种极具亮点新意的广告形式为商家进行宣传。旨在充分利用大学生日常大量复印中浪费掉的背面进行广告的投放。一方面减少传单的投放,进而减少传单对社会环境的污染;另一方面,也节约了大量的纸张,最终会为我国的生态事业做出贡献。这也是商家对品牌进行校园推广的一种全新有效的模式。在如今传单泛滥、人们漠视的情况下,有这样一种高格调的能让广告与同学们自身需要的内容紧密联系、并能够永存的广告形式,宣传爱心和谐环保节约的理念!并帮助大学生成长,最终反哺企业!
2.2.2 免费复印的优点
● 广告效果好
广告随大学生复印的学习资料、笔记、学生社团活动材料等自然而然地来到他们的身边,在学生们使用这些复印资料时,广告也一次次被他们有意无意地看见,一次次在他们的脑海中强化。阅读次数多,强迫阅读度高,广告效果自然就好。
● 广告留存时间长
因为复印了大学生们自己需要的东西,所以广告不会被马上丢弃。与其他形式相比,本项目的广告保存时间是最长的,有些复印资料(广告)甚至可能留存数年之久。
● 广告的相互传播
大学生们朝夕相处,相互借阅学习资料是很频繁的,至于活动资料就更不用说了,那本身就是要相互传阅的。
● 广告易被接受
在散发普通平面广告时,常常遇到拒绝或随手丢弃的情形,而“免费复印”的广告因为复印是对学生免费的,所以很容易被学生们接受。“毕竟‘免费复印’为我省了钱,所以我看背面的广告时心态会比较平和。”广告被大家主动索取,还有比这更美妙的事吗?
● 广告监控
我们拥有一整套完善的保障与监督措施,聘请了大量的学生监督员,能很好地保证“免费复印” 广告发布平台的正常、高效运转;在投放广告时,我们还会把投放广告的高校加盟复印店的名称、地址、电话及具体投放数量告诉商家,以便商家监督。
2.3.免费复印的前景 中国目前大学生消费能力将近1800亿元,对于任何一个想进入学生市场的商家无疑具有巨大的吸引力,他们将想方设法进入学生市场,提高自己的影响力。而免费复印这种形式给他们提供了一个很好的渠道。
第三章 市场机会
3.1.市场特征
根据《2007中国大学生消费与生活形态研究报告》,大学生年均消费超万元。越来越多的商家看到巨大的学生市场容量,希望通过一定的宣传手段进入学生市场,特别是很多针对学生市场的产品,如电脑、手机、数码产品、饮料、运动休闲和培训机构等。而目前的几种宣传手段都有各自的优缺点,不是十分理想。
另外一方面,大学生一年需要用到大量的复印纸,根据我们的调查,每人平均用30~60张。由于学生每次的复印量不大,复印店对找零钱的事烦恼。根据我们对复印店的走访,在我们提供每张纸0.04~0.06元/张补偿时,复印店愿意提供学生免费复印。
3.2竞争分析
3.2.1目前主要的校内广告竞争产品
①传单
1)在学校租场地。a470克黑白印刷每万份是700元,人力资本费用大约每千张100元、并向学校缴纳场地费约2000元,每天大约发2000张,合1.1元一张。
2)最经济的方法——送到寝室,省去场地费。每天发100个宿舍,按平均每寝室5人算,每天发500张,每人工资60-70每天,加上传单成本合0.2元/张。缺点风险高不合法,学校追究,对企业形象有损,并且如今传单泛滥,学生基本不看。
3)传单合法化出路——和社团合作,一般赞助费用1000-3000,价格更高。
②杂志
现在有一些在校园里面免费发行的杂志,例如《loft》,底封面广告55000,具体价格见附表,每期发行50000份,做底封面广告需每本投入1.1元。现今无一种杂志能够占领大学生市场,也就意味着这样的杂志广告的受众群体是多少,无数字能够证明。
广告规格 | 成品尺寸(宽mmx高mm)报价(元) | 单期 (两个月) 价 | 三期(六个月) 价 | 六期(12个月) 价 |
封面拉页 | 210mm(w)x285mm(h) | 110,000 | 330,000 | 660,000 |
封面刊头 | 35mm(w)x40 mm(h) | 18,000 | 54,000 | 108,000 |
封底1p | 210mm(w)x285mm(h) | 66,000 | 198,000 | 396,000 |
封底拉页1p | 420mm(w)x285mm(h) | 97,000 | 219,000 | 582,000 |
封二1p | 210mm(w)x285mm(h) | 64,000 | 192,000 | 576,000 |
封三1p | 210mm(w)x285mm(h) | 57,000 | 171,000 | 342,000 |
封内第一跨页 | 420mm(w)x285mm(h) | 100,000 | 300,000 | 600,000 |
封内第二跨页 | 420mm(w)x285mm(h) | 90,000 | 270,000 | 540,000 |
封内第三跨页 | 420mm(w)x285mm(h) | 79,000 | 237,000 | 474,000 |
封内第四跨页 | 420mm(w)x285mm(h) | 67,500 | 202,500 | 405,000 |
封内第五跨页 | 420mm(w)x285mm(h) | 56,000 | 168,000 | 336,000 |
目录前跨页 | 210mm(w)x285mm(h) | 52,000 | 156,000 | 312,000 |
目录页1/3p | 60 mm(w)x285mm(h) | 32,000 | 96,000 | 192,000 |
目录对应页1p | 210mm(w)x285mm(h) | 50,000 | 150,000 | 300,000 |
③讲座和展会
有商业宣传的讲座要300到1000不等,要是用报告厅就要1000以上,展会要是露天10平方以内的一般是1000-1500,一天10平方以内的都在1000左右。
3.2.2竞争优势
◆ 成本低
整版广告 | 部分广告 | |
80克a4水印彩色 | 0.35元/张 | 0.2元/张 |
80克a4水印黑白 | 0.25元/张 | 0.15元/张 |
◆ 广告价值高,以一传百。
据调查人们能够记住广告的内容一般要在看过七次以上,既然学生决定花时间去复印的资料那一定不是只看一两遍的。而且据调查,学生们的学习资料一般都反复利用,不仅在寝室班级中传阅,并且一般都传给下界的师弟妹们。况且,这种广告形式一般在学生学习疲倦的时候,可以放松心情看广告,最容易对广告内容发生兴趣
◆环保节约
充分利用大学生日常大量复印中浪费掉的背面进行广告的投放。一方面减少传单的投放,每减少10000张传单就挽救了一棵大树!每减少一吨纸就节约了70吨水!进而减少传单对社会环境的污染;另一方面,也节约了大量的纸张,最终会为我国的生态事业做出贡献。
3.2.3 主要风险
◆竞争对手风险
竞争对手风险是指缺乏有竞争意义的技术,模式很容易被复制,竞争对手容易进入。
规避措施:确定自己的无形资产优势:优秀的品牌的形象和良好的商业信用。因为还没有开辟这块市场,可以迅速的进入,与商家和复印店建立良好的关系,设置壁垒。
◆ 财务风险
财务风险包括以下方面的内容:
1)现金流量风险,主要表现在:①业主只对企业的主要财务指标如资产负债率、净资产收益率等感兴趣,而忽视了指标掩盖下的问题;②过分注意利润和销售的增长,而忽视手中掌握的现金;③固定资产投资过多,使企业的变现能力降低,导致资金沉淀;④企业规模盲目扩张,缺乏相应的短、中、长期计划。
规避措施:筹资风险规避的技术方法。①充分利用自有资金,加强对自有资金的控管,对各种借支款项要严格审批并及时催收;②选择合理的资本结构,即债务资本和自有资本的比例要适当,充分利用债务资本的财务杠杆作用,选择总风险较低的最佳融资组合;③注意长短期债务资本的搭配,避免债务资本的还本付息期过于集中。
2)资金回收风险,指资金不能及时周转或资金流出后不能及时收回的风险。
规避措施:做好资金来源、资金占用、资金分配和资金回收的测算和平衡,以保证资金的安全性、效益性和流动性。
3)应收账款回收风险,指客户没有及时支付对我们的帐款。
规避措施:①利用“五c”系统对客户进行科学评估,对不同的客户给予不同的信用期间、信用额度和不同的现金折扣,制定合理的资信等级和信用政策;②在现销和赊销之间权衡,当赊销所增加的盈利超过所增加的成本时,才应当实施应收账款赊销。
◆ 管理风险
1)任员:企业高级管理者及重要技术人员的变动给企业发展带来的风险。
2)组织结构:企业的组织结构是否适应企业发展的需要,能否发挥组织的最大效率。
3)管理机制:管理机制是否先进,健全,其效率的高低影响企业发展。
对策
1)对企业高层管理者及重要技术人员给予优厚的待遇,同时给予他们充分发挥个人才能,实现自身价值的机会。
2)建立适合企业发展的组织结构,并在企业发展过程中不断调整,以确保其效率。
3)采用先进的,适合本企业实际的管理机制,发挥该机制的最大效用
3.3 市场容量
3.3.1市场容量
根据《2007中国大学生消费与生活形态研究报告》,当代大学生具有较强的消费能力。他们每学期的平均收入为4919元,支出为4819元,而将大学生在两个假期的支出计算在内,我国大学生每年的平均消费支出已经在一万元以上。我国目前有将近1800万大学生,其平均消费支出总额已达1800亿元。而且大学生具有明显的品牌意识,其消费领域主要集中在电脑、手机、数码产品、饮料、运动休闲和培训机构等,任何一个以上领域商家肯定会重视大学生市场。
3.3.2 趋势分析与预测
自中国教育部的消息,大学仍将继续扩招,扩招比例预计在8%左右。到2010年,高等职业教育招生规模要占高等教育招生规模的一半以上。以后数年也会有一定比例的扩招。因此,市场容量在不断的扩大,市场潜力巨大。
3.4政策影响
① 政府对大学生创业的优惠政策。如减免行政事业性收费,可申请小额担保贷款等。
② 此项目环保节约,响应“绿色环保”号召,会得到政府支持。
第四章 公司战略
4.1.公司概述
4a文化传媒有限责任公司是以环保、便利为业务立足点的创意文化公司。4a表示公司的对外口号:服务a、质量a、价格a和口碑a,而调换位置就是a4,即公司的广告载体a4纸。
公司的商标图案正中间是初生的旭日,象征团队蓬勃的朝气和丰富的创造力;整体图案从两个不同的角度看起来可以认为是“4”和“a”的结合体。
4.2总体战略
公司在未来3年成为浙江省最大,8年成为全国最大的 “免费复印”业务文化传播公司。
4.3发展战略
初期 (1年)
1. 宣传自己,树立形象。
2. 蓄势待发,联系合作店家,首先选择和在杭城各大高教园区具有代表性的店家取得合作。初步建立服务市场网络。
3. 广而告之,并开始联系合作商家正式进去运作。
4. 成功立足,开始盈利后进一步宣传自己以提升形象。
5. 合作高校复印店达到15个,所有合作复印店年复印用纸累计总量达到250万张,合作复印店达到15个,以每张0.25元的价格计,年收入达到62.5万元。合作复印店数量占杭州大学总数的1/3左右。(杭州高校的数量在40所左右,大学生的数量在25万左右。)
中期 (7年)
1. 扩张:与杭城每个高校周边的店家取得合作。整个杭州范围内合作复印店年复印用纸总量累计达到750万张,合作复印店到35~40个,年收入达到187.5万元。(1年)
2. 进一步完善市场网络,将凯发官网首页的业务范围扩大至整个浙江省乃至全国的高校市场。
公司花一年时间将业务扩大至整个浙江省。所有合作复印店年复印用纸总量达到1500万张,年收入达到375万元。
据调查,各省高校大多数位于省会,因此,全国的扩张将将实行由省会向各省的其它市扩张,逐步深入。花上5年时间,基本实现每年的复印量增加一倍,即收入增加一倍。到基本占领全国高校市场后(2007年我国普通本专科在校生规模约为1800万人,并且每年有递增的趋势),年复印量达到54000万张,年收入达到13500万。
后期 (5~10年)
公司稳步发展后,可以建立自己的印刷厂,并有选择性的在高校周围开设属于自己的复印店。
◆复印量和收入表
年份 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | … | 8 | … |
复印量 | 250w | 750w | 1500w | 3000w | 6000w | … | 35000w | … |
利润 | 62.5w | 187.5w | 375w | 750w | 1500w | … | 1750w | … |
第五章 市场营销
5.1目标市场
近几年,杭州越来越多的公司开始进军学生市场,把产品推销进大学校园,或者在校园里大肆张贴其产品广告。像很多生产数码产品的公司更是经常在大学里最热闹的地方摆摊直接进行展示和销售;另外,大学附近有很多驾校做的也是学生的生意,他们除了在校园里张贴宣传海报外,还直接找学生代理,帮他们寻找生源。从中可以看出,学生身上的市场价值,是众多商家所看好的,因此许多商家早已将学生的消费趋势进行了准确定位。而这无疑也使我们看到了另一个市场——商家,有多少公司愿意打入学生市场,就有多少公司进入我们的市场。
进过初步调查分析,目前在杭州各个大学里宣传和销售做的最火爆的无非是那些电脑、手机、数码产品、饮料、运动休闲和培训机构等商家,我们将从这里做突破口进军商家市场。
5.2 广告产品
5.2.1 广告产品形式
我们会更据商家的要求制作黑白或彩印广告,也可以推出整版广告或部分广告的形式。一切都会响应我们的口号:服务a、质量a、价格a和口碑a。
5.2.2 服务
建立完善的销售服务网络,为客户提供健全优质的服务。
◆ 前期 将客户的广告在印刷厂印好后,向客户提供印刷的样品及数量证明。
◆ 中期 将印刷好的a4纸送到各高校加盟复印店,每天向客户提供各个复印店印刷的数量。
◆ 后期 公司将会对广告效果进行调研,并将调研结果第一时间反应给客户。
5.2.3 品牌
公司将尽一切努力让“4a”在客户中树立明确的品牌形象,提升公司的企业及品牌形象,实现无形资产的增值。
建立商标防护网,注册品牌和商标,利用有关国际条约保护自己的权益;提前在网络上注册公司的域名,为发展电子商务打下基础;宣传产品品牌,提高品牌知晓度。
建立品牌忠诚度是扩大市场份额的重要方式。4a文化传媒公司从以下几个方面努力:
◆ 以完善的服务提高品牌忠诚度。公司将以健全优质的服务是赢得顾客品牌忠诚度。公司将建立健全的服务网络,覆盖整个销售区域;建立完善的优质服务制度,为产品巩固及扩大市场作不断的努力。
◆ 良好的公共形象对于品牌的形象具有至关重要的影响。公关活动将始终被公司作为树立和提升企业形象、产品品牌形象的重要工作之一。
5.3 价格
针对不同的客户,我们拟采取“依量而定”的价格策略,量大和长期合作客户优惠多,大约定在成本价的200—250%。同时根据竞争对手的价格和本身成本浮动做出适当调整。
5.4市场开发与进入
公司将自建销售渠道,采取区域与整体相结合的策略,根据客户的不同分别设立市办事处、省办事处和全国办事处。
◆ 市办事处 负责与需要在所在市做广告的客户洽谈。
◆ 省办事处 负责与需要在所在省做广告的客户洽谈。
◆ 全国办事处 负责与需要在多个省或全国做广告的客户洽谈。
5.5 推广策略
5.5.1 直接与商家联系
公司的业务员直接与电脑、手机、数码产品、饮料、运动休闲和培训机构等公司联系,介绍我们的项目。
5.5.2 网站推广
公司将自己的信息等发到一些企业黄页网站上,宣传自己。
5.5.3 网站建设
我们在互联网上建立公司网站,通过网站建设使企业了解本公司,并来洽谈业务。
5.5.4 电话营销
我们通过给目标企业打电话,主动寻找客户。
第六章 投资分析
6.1 股本结构与规模
公司成立初期共需资金50万,其中风险投资33万,五位创业团队成员共出资17万元。
股本规模及结构暂定为:公司注册资本50万。外来风险投资入33万(66.00%);六位创业团队成员资金入股17万(占34.00%)
公司注册资本50万。股本结构和规模如下:
股本来源 股本规模 | 风险投资 | 团队成员资金入股 | |
金 额 | 33万 | 17万 | |
比 例 | 66.00% | 34.00% |
股本结构中,团队成员资金入股占总股本的34%,风险投资方面,我们打算引入2—4家风险投资共同入股,以利于筹资,化解风险。
6.2 初期投资分析
初期投资(单位:元)
公司创办费 | 3000 |
办公室租赁费 | 30000 |
办公室装修 | 30000 |
办公设备购买 | 40000 |
网站建设 | 5000 |
流动资金 | 392000 |
合计 | 500000 |
6.3 投资收益与风险分析
投资现金流量表如下:
投资现金流量表
单位:元
初期(资金筹集) | 第一年 | 第二年 | 第三年 | 第四年 | 第五年 | |
固定资产投资 | 0 | 40,000 | 0 | 120,000 | 160,000 | 160,000 |
流动资金 | 500,000 | 0 | 0 | 30,000 | 50,000 | 50,000 |
营业收入 | 628,000 | 1,880,000 | 3,758,000 | 7,510,000 | 15,013,000 | |
-变动成本 | 308,698 | 369,238 | 1,054,692 | 1,881,646 | 3,179,408.00 | |
-固定成本 | 250,000 | 750,000 | 1,500,000 | 3,000,000 | 6,000,000 | |
税前利润 | 0 | 69,302 | 760,762 | 1,233,308 | 2,678,354 | 5,883,592 |
-税收 | 17,325.50 | 190190.5 | 308,327 | 669,588.50 | 1,470,898 | |
税后利润 | 0 | 51,976.50 | 570,571.50 | 924,981 | 2,008,765.50 | 4,412,694 |
折旧 | 8889 | 7778 | 33,334 | 64,442 | 91,114 | |
净现金流量 | -500,000 | 60,865.50 | 578,349.50 | 958,315.00 | 2,073,207.50 | 4,503,808.00 |
6.3.1投资净现值
投资净现值表
年份 | 现金流量 | 利率10% | 现值 | 累积现值 |
0 | -500,000 | 1 | -500000 | -500000 |
1 | 60,866 | 0.909 | 55326.74 | -444673 |
2 | 578,350 | 0.826 | 477716.7 | 33043.43 |
3 | 958,315 | 0.751 | 719694.6 | 752738 |
4 | 2,073,208 | 0.683 | 1416001 | 2168739 |
5 | 4,503,808 | 0.621 | 2796865 | 4965603 |
npv | 4965603 |
npv=∑(ci-co)t(1 i)-t npv=4965603 (元)
t=1
考虑到目前资金成本较低,以及资金的机会成本和投资的风险性等因素,i取10%(下同),此时,npv=4965603(元),远大于零。计算期内盈利能力很好,投资方案可行。
6.3.2 投资回收期
n=1年+(444673/477716.7*12)个月=1年11个月
通过净现金流量、折现率、投资额等数据用插值法计算,投资回收期为一年零11个月,投资方案可行。
6.3.3内含报酬率
年份 | 现金流量 | 110% | pv | 年份 | 现金流量 | 2.00 | pv |
0 | -500,000 | 1 | -500000 | 0 | -500,000 | 1 | -500000 |
1 | 60,866 | 0.476 | 28971.98 | 1 | 60,866 | 0.50 | 30433 |
2 | 578,350 | 0.226 | 130707 | 2 | 578,350 | 0.25 | 144587 |
3 | 958,315 | 0.107 | 102539.7 | 3 | 958,315 | 0.13 | 119789 |
4 | 2,073,208 | 0.051 | 105733.6 | 4 | 2,073,208 | 0.0625 | 129575 |
5 | 4,503,808 | 0.024 | 108091.4 | 5 | 4,503,808 | 0.03 | 140744 |
npv | -23956 | npv | 65129.0 |
irr=100% (10%*65039.6/(65039.6 23956))=107%
内含报酬率达到107%,远大于资金成本率10%,主要因为本服务优质低价,使得利润率较高,而且,前5年内市场增长性很好。
6.3.4项目敏感性分析
公司在销售收入、投资、经营成本上存在来自各方面的不确定因素,我们对三者按提高10%和降低10%的单因素变化做敏感性分析。用逐项替代法计算投资回收期和内含报酬率。(见下图:)
内含报酬率
销售收入
公司内含报酬率为107%
107%
投资
经营成本
-10% 0 10%
不确定因素变化率
项目敏感性分析表
项 目 | 投资 | 经营成本 | 销售收入 | |||
-10% | 10% | -10% | 10% | -10% | 10% | |
内含报酬率 | 114% | 102% | 117% | 100% | 70% | 124% |
投资回收期(年) | 1.83 | 2.02 | 1.78 | 2.07 | 2.59 | 1.72 |
公司对销售收入的提高和降低最为敏感,经营成本次之。在变化±10%范围内,内含报酬率仍然高达100%,说明能承担风险,具有一定可靠性。
6.3.6.投资回报
根据对未来几年公司经营状况的预测,公司能保持较高的利润增长,拟从净利润中提取合理比例的资金作为股东回报。为此,公司第一年不分红,第二年以后每年分红为净利润的30%。
第七章 财务分析
7.1. 会计报表及附表
7.1.1. 主要财务假设
1、会计制度:公司执行《企业会计制度》。
2、会计年度:以公历每年一月一日起至十二月三十一日止为一个会计年度。
3、记账本位币:以人民币为记账本位币。
4、记账基础和计价原则:以权责发生制为记账基础,以历史成本为计价原则。
5、固定资产折旧采用年数总和法,按8年的折旧年限计提折旧。
6、公司的总收入依据公司战略发展,即前五年分别为625000元,1875000元,3750000元,7500000元,15000000元。一个省最终有4个城市设立办事处。
8、公司适用的税(费)种和税(费)率列示如下:公司营业税及附加税(5%),企业所得税(25%)。
9、从创办开始,公司每年按净利润的10%提取盈余公积,每年按净利润的5%提取公益金。
10、根据对未来几年公司经营状况的预测,公司能保持较高的利润增长,拟从净利润中提取合理比例的资金作为股东回报。为此,公司第一年不分红,第二年以后每年分红为净利润的30%。
11、应收账款为销售收入的20%,应付账款为主营业务成本的20%。
7.1.2 业务支出明细表
业务支出明细表
单位:元
项目 年份 | 第一年 | 第二年 | 第三年 | 第四年 | 第五年 |
企业开办费 | 3000 | 0 | 0 | 0 | 0 |
主营业务成本 | 250,000 | 750,000 | 1,500,000 | 3,000,000 | 6,000,000 |
工资 | 96,400 | 115,200 | 200,000 | 350,000 | 500,000 |
福利费 | 13,080 | 15,000 | 26,000 | 45,500 | 65,000 |
办公费 | 12,160 | 36,480 | 72,960 | 145,920 | 291,480 |
差旅费 | 7,000 | 21,000 | 42,000 | 84,000 | 168,000 |
修理费 | 0 | 0 | 5,000 | 10,000 | 15,000 |
租赁费 | 30,000 | 30,000 | 100,000 | 180,000 | 350,000 |
装修费 | 30,000 | 0 | 90,000 | 120,000 | 120,000 |
办公设备购置费 | 40,000 | 0 | 120,000 | 160,000 | 160,000 |
职工培训费 | 5,000 | 5,000 | 15,000 | 25,000 | 35,000 |
业务招待费 | 10,000 | 25,000 | 50,000 | 100,000 | 200,000 |
营业税及附加 | 31,250 | 93,750 | 187,500 | 375,000 | 750,000 |
劳动保险费 | 29,808 | 29,808 | 119,232 | 238,464 | 476,928 |
营业外支出 | 2,000 | 3,000 | 5,000 | 8,000 | 11,000 |
网站建设 | 5,000 | 0 | 0 | 0 | 0 |
合计 | 564,968 | 1,124,238 | 2,532,692 | 4,841,884 | 9,142,408 |
7.1.3. 业务收入明细表
业务收入明细表
单位:万元
项目 年份 | 第一年 | 第二年 | 第三年 | 第四年 | 第五年 |
主营业务收入合计 | 62.5 | 187.5 | 375 | 750 | 1500 |
营业外收入 | 0.3 | 0.5 | 0.8 | 1.0 | 1.3 |
合计 | 62.8 | 188 | 375.8 | 751 | 1501.3 |
7.1.4. 利润及利润分配表
利润及利润分配表
单位:元
项目 | 第一年 | 第二年 | 第三年 | 第四年 | 第五年 |
一、营业收入 | 625,000 | 1,875,000 | 3,750,000 | 7,500,000 | 15,000,000 |
减: 营业成本 | 250,000 | 750,000 | 1,500,000 | 3,000,000 | 6,000,000 |
营业税金及附加 | 31250 | 93750 | 187500 | 375000 | 750000 |
管理费用 | 278,448 | 270,488 | 829,192 | 1,812,646 | 2,366,408 |
二、营业利润 | 65302 | 760,762 | 1,233,308 | 2,678,354 | 5,883,592 |
加:营业外收入 | 3,000 | 5,000 | 8,000 | 10,000 | 13,000 |
减:营业外支出 | 2,000 | 3,000 | 5,000 | 8,000 | 11,000 |
三、利润总额 | 66,302 | 762,762 | 1,236,308 | 2,680,354 | 5,885,592 |
减:所得税 | 16,575.50 | 190,690.50 | 309,077.00 | 670,088.50 | 1,471,398.00 |
四、净利润 | 49,726.50 | 572,071.50 | 927,231.00 | 2,010,265.50 | 4,414,194.00 |
加:年初未分配利润 | 0 | 42,267.53 | 356,906.85 | 866,883.90 | 1,972,529.93 |
五、可供分配的利润 | 49,726.50 | 614,339.03 | 1,284,137.85 | 2,877,149.40 | 6,386,723.93 |
减:提取公益金(5%) | 2,486.33 | 28,603.58 | 46,361.55 | 100,513.28 | 220,709.70 |
减:提取法定公积金(10%) | 4,972.65 | 57,207.15 | 92,723.10 | 201,026.55 | 441,419.40 |
减:股东分配的利润 | 0 | 171,621.45 | 278,169.30 | 603,079.65 | 1,324,258.20 |
六、未分配利润 | 42,267.53 | 356,906.85 | 866,883.90 | 1,972,529.93 | 4,400,336.63 |
7.1.5. 现金流量表
现金流量表
项 目 | 第一年 | 第二年 | 第三年 | 第四年 | 第五年 |
一、经营活动产生的现金流量: | |||||
销售商品、提供劳务收到的现金 | 621,875 | 1,865,625 | 3,731,250 | 7,462,500 | 14,925,000 |
现金流入小计 | 621,875 | 1,865,625 | 3,731,250 | 7,462,500 | 14,925,000 |
购买商品、接受劳务支付的现金 | 250,000 | 750,000 | 1,500,000 | 3,000,000 | 6,000,000 |
经营租赁所支付的现金 | 30,000 | 30,000 | 100,000 | 180,000 | 350,000 |
支付给职工的现金 | 96,400 | 115,200 | 200,000 | 350,000 | 500,000 |
支付的所得税 | 16,575.50 | 190,690.50 | 309,077.00 | 670,088.50 | 1,471,398.00 |
支付其他与经营活动有关的现金 | 245,255.99 | 365,830.98 | 979,593.73 | 1,687,220.64 | 3,197,822.83 |
现金流出小计 | 638,231.49 | 1,451,721.48 | 3,088,670.73 | 5,887,309.14 | 11,519,220.83 |
经营活动产生的现金流量净额 | -16,356.49 | 413,903.52 | 642,579.27 | 1,575,190.86 | 3,405,779.17 |
二、投资活动产生的现金流量: | |||||
购建固定资产所支付的现金 | 40,000 | 0 | 120,000 | 160,000 | 160,000 |
投资活动产生的现金流量净额 | -40,000 | 0 | -120,000 | -160,000 | -160,000 |
三、筹资活动产生的现金流量: | |||||
吸收权益性投资所收到的现金 | 500,000 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 |
借款所收到的现金 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
现金流入小计 | 500,000 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 |
偿还借款所支付的现金 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
分配股利所支付的现金 | 0 | 171,171.45 | 277,494.3 | 602,629.65 | 1,323,808.2 |
偿付利息所支付的现金 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
现金流出小计 | 0 | 171,171.45 | 277,494.3 | 602,629.65 | 1,323,808.2 |
筹资活动产生的现金流量净额 | 500,000 | -171,171.45 | -277,494.3 | -602,629.65 | -1,323,808.2 |
四、现金及现金等价物净增加额 | 443,643.51 | 242,732.07 | 245,084.97 | 812,561.21 | 1,921,970.97 |
7.1.6. 资产负债表
资产负债表
单位:元
项目 | 第一年 | 第二年 | 第三年 | 第四年 | 第五年 |
资产 | |||||
货币资金 | 443,643.51 | 686,375.58 | 931,460.55 | 1,744,021.76 | 3,665,992.73 |
应收帐款 | 125,600 | 376,000 | 751,600 | 1,502,000 | 3,002,600 |
减:坏帐准备 | 628 | 1880 | 3758 | 7510 | 15013 |
应收帐款净额 | 124,972 | 374,120 | 747,842 | 1,494,490 | 2,987,587 |
流动资产合计 | 568,615.51 | 1,060,495.58 | 1,679,302.55 | 3,238,511.76 | 6,653,579.73 |
长期投资 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
固定资产 | |||||
固定资产原价 | 40,000 | 40,000 | 160,000 | 200,000 | 200,000 |
减:累计折旧 | 8889 | 7778 | 33,334 | 64,442 | 91,114 |
固定资产净值 | 31,111 | 32,222 | 126,666 | 135,558 | 108,886 |
固定资产合计 | 31,111 | 32,222 | 126,666 | 135,558 | 108,886 |
资产总计 | 599,726.51 | 1,092,717.58 | 1,805,968.55 | 3,374,069.76 | 6,762,465.73 |
负债 | |||||
应付帐款 | 50000 | 150000 | 300000 | 600000 | 1200000 |
负债合计 | 50000 | 150000 | 300000 | 600000 | 1200000 |
所有者权益 | |||||
实收资本 | 500,000 | 500,000 | 500,000 | 500,000 | 500,000 |
未分配利润 | 42,267.53 | 356,906.85 | 866,883.90 | 1,972,529.93 | 4,400,336.63 |
公益金 | 2,486.33 | 28,603.58 | 46,361.55 | 100,513.28 | 220,709.70 |
盈余公积 | 4,972.65 | 57,207.15 | 92,723.10 | 201,026.55 | 441,419.40 |
负债及所有者权益 | 599,726.51 | 1,092,717.58 | 1,805,968.55 | 3,374,069.76 | 6,762,465.73 |
7.1.7 会计报表分析
重要报表数据提示:
· 五年销售收入(元):625000;1875000;3750000;7500000;15000000;
· 五年净利润 (元):49726.50;572071.50;927231.00;2010265.50;4414194.00;
· 达到正现金流所需时间: 二十一个月;
7.1.8.比率及趋势分析
项目(%) | 第一年 | 第二年 | 第三年 | 第四年 | 第五年 |
销售利润率 | 0.1045 | 0.4057 | 0.3289 | 0.3571 | 0.3922 |
基本盈利能力 | 0.0796 | 0.3051 | 0.2473 | 0.2680 | 0.2943 |
资产报酬率 | 0.1206 | 0.8091 | 0.8209 | 0.9662 | 1.0581 |
净资产收益率 | 0.0905 | 0.6068 | 0.6157 | 0.7247 | 0.7936 |
7.1.9 预计销售趋势分析
注:
· 从销售趋势图可至第五年后销售量及销售收入增长趋于平缓,因而销售利润率基本保持在30%左右;
第八章 管理体系
8.1公司性质: 有限责任公司
8.2组织形式:公司初期拟采取直线制的组织形式,如图所示:
公司组织结构图
8.3 部门职能
总经理:直接由董事会产生,为本公司内部的执行首长,在董事会监督下组织实施公司年度经营计划和投资方案,制定公司的具体规章,主持公司的日常生产经营管理,组织实施董事会决议,并将实施情况向董事会报告。
市场部:负责公司的营销战略计划,联系并承接各种业务。
人力资源部:负责吸收适合公司并有意向加入公司的人才,做好每次任务的调配与联系工作,注意与专家的沟通与反馈。
广告设计部:负责对客户广告的设计。
财务部:适应现代公司财务管理要求,定期做出内部财务报表,分析公司运营情况及其原因,为决策部门提供信息支持和决策建议,降低风险。
第九章 风险资本的退出
9.1退出时间
投资退出的时间选择是按照市场周期而定的,由于本企业的投资回收期约为一年零十一个月,因而建议投资者从投产后第三年开始退出。
9.2退出方式
风险投资的退出机制是整个风险投资运作过程中一个重要的组成部分,是实现风险投资目标的关键环节。
目前,风险投资退出渠道主要有四种:公开上市;股权回购;企业兼并收购;风险企业清算。
根据我公司的具体情况,并以对风险投资者负责的态度,降低其风险,拟采用股权回购的方式作为风险资本的退出机制。
选择股权回购的原因:
1、而考虑到企业的规模不大,盈利能力较强等实际情况,以及目前国内管理层通过信托等方式融资渠道的拓宽,我们选择在时机成熟时以股权回购作为风险投资的退出方式,这种方式有利于保障风险投资的利益,降低其风险。
2、在资金相对充裕时进行股权回购,是管理层对企业进一步有效的掌控的合理选择,更加有利于企业本身的发展和壮大。
附录一 管理团队及成员介绍
浙江工业大学“4a”文化传媒团队由我校在读大学本科生组成,并邀请我校经贸学院陈春根老师担任指导老师,每位团队成员均有扎实的专业知识和丰富的社会实践经验,加上良好的团队协作精神和老师的指导,会有助于公司战略目标的最终实现。
附录三 学生调查问卷
亲爱的同学:
您好!请您先仔细阅读题目及答案,再根据您对题目叙述的看法,逐题填写。本问卷的各项答案无所谓好坏对错,且问卷所得结果只做团体性分析,不做任何个别呈现。对外绝对保密,请您按照实际情况和真实想法填写问卷。
在此,我们对您的合作与支持表示衷心的感谢!
1.您所学的专业是_____________
2.您所在的年级为________
a.04级 b.05级 c.06级 d.07级
3.您去复印店复印的资料类型为________
a.活动策划与总结 b.作业 c.宣传单或海报 d.其他_________
4.你每次去复印店复印的数量为_________
a.3份以内(含3份) b.4—7份 c.8-10份 d 10份以上
5.您每年去复印店复印的数量________
a.0-30份左右 b.30-60份左右 c.60—100份 d.100份以上
6. 您介意在您打印的资料背面上附有广告吗?为什么?
a.介意 b.不介意
原因:______________________________________________________________
7.如果您愿意在您的复印资料背面附上广告,您期望是哪种类型的广告?
a.数码产品 b培训机构 c.报纸杂志 d网络 e.其他_________
8.如果有家复印店能免费为您复印资料,并在您复印的资料背面附有广告,您会接受吗?为什么?
a.会 b.不会
原因:_____________________________________________________________
附录四 调研结果分析
㈠学生调研与分析
我们对学生采取了问卷随机调查的形式,共300张,对浙江工业大学朝晖校区、屏风校区、浙江科技学院、杭州电子科技大学下沙校区、中国计量学院、浙江理工大学下沙校区6个校区进行了调研,每个校区50张,实际回收300张。调查结果显示:学生一般一次复印的数量在3份以内,每年去复印店复印数量在30-60份左右,基本接受背面附有广告的免费复印。具体调研结果如下:
调查结果显示:
① 每次复印的数量: 3份以内(含3份)占52%, 4—7份占22%,8-10份占 16% ,10份以上占10%
② 每年去复印店复印的数量:0-30份左右占16%,30-60份左右占48%, 60—100份占20%,100份以上占16%。
③ 如果不是正式资料(如毕业论文),提供免费复印时,学生大部分接受背面有广告,接受率为99.3%.
④ 学生希望背面的广告类型为电脑、手机、数码产品、饮料、运动休闲和培训机构等。
㈡ 复印店调研结果与分析
我们对浙江工业大学朝晖校区、屏风校区、浙江科技学院、杭州电子科技大学下沙校区、中国计量学院、浙江理工大学下沙校区6个校区的8家复印店进行了走访,调研结果显示文印店一天复印的量在2000-5000张左右,要求的利润补贴在0.03-0.06元/张,具体如下:
浙江工业大学朝晖校区—精宏文印店
一天的量:5000张左右
要求的利润补贴:6分/张
联系人:郑老板
联系方法:13868121959
浙江工业大学朝晖校区—尚一文印店
一天的量:5000张左右
要求的利润补贴:6分/张
联系人:方老板
联系方法:13666672705
浙江工业大学朝晖校区—梦溪文印店
一天的量:2000张左右
要求的利润补贴:4分/张
联系人:胡老板
联系方法:88320042
浙江工业大学屏风校区—力维文印店
一天的量:5000张左右
要求的利润补贴:5分/张
联系人:王老板
联系方法:85290928
浙江科技学院—腾辉文印店
一天的量:2000张左右
要求的利润补贴:5分/张
联系人:王老板
联系方法:56817423
杭州电子科技大学——超群数码快印
一天的量:3000张左右
要求的利润补贴:6分/张
联系人:孙老板
联系方法:86848892
中国计量学院文印店
一天的量:3000张
要求的利润补贴:5-6分/张
联系人:沈老板
凯发官网首页的联系方式:56602132
浙江理工大学——卓越图文
一天的量:2500-4000张
要求的利润补贴:3分/张
联系人:许老板
凯发官网首页的联系方式:13957144899或者13757152526
㈢ 印刷厂调研结果与分析
我们和杭州洪兴印刷厂和杭州诚兴印刷厂进行了电话联系,愿意以0.05元 /张的价格为我们印刷80g复印纸,而同等复印纸彩印价格为0.10元/张。
㈣ 商家调研结果与分析
我们对话机世界、昂立口译、西城驾校、宏图三胞的市场部进行了电话联系,他们对我们的项目表示了浓厚的兴趣,表示在价格适宜的情况下愿意做这种形式的广告 。
附录五 与复印店合作协议书
甲方: 4a文化传媒公司
乙方: **复印店
现有甲乙双方就“免费复印一事”,本着“互惠互利,共同发展”的原则,在“平等、自愿”的基础上,签定本合同,内容如下:
1.甲乙双方须共同遵守合同法及相关国家法律法规。
2.由甲方向乙方提供背面印有商家广告的复印纸,乙方需首选甲方提供的复印纸向学生顾客提供复印。只有在顾客要求用普通复印纸时方可采用普通纸复印。
3.已方采用背面印有商家广告的复印纸给学生复印时,不能收取任何费用。
4.对于乙方免费复印的纸张,甲方按每0.05元/张利润补偿。
5.甲方会提供一个调查表格置于乙方店内以用与调查复印量及广告接受情况,乙方店内负责人需监督学生顾客完成此调查活动。
6.甲方在乙方每次复印完所提供纸张后,付给乙方全部利润补偿。
7.乙方不得浪费甲方所提供的纸张,否则甲方有权拒绝付给乙方所有利润补偿,并有权要求乙方赔偿甲方所损失的一切费用。
8. 乙方为甲方的特约加盟店,不得另外和与此形式相同的公司合作。
9. 本合同一式两份,双方各执一份,自签字盖章之日起生效。
甲 方:___________________ 乙 方:___________________
代 表:___________________ 代 表:___________________
(盖章) (盖章)
年 月 日 年 月 日
附录六 与印刷厂合作协议书
甲方: 4a文化传媒公司
乙方:***印刷厂
甲乙双方本着“互惠互利,共同发展”的原则,在“平等、自愿”的基础上,签定本合同,内容如下:
1.甲乙双方须共同遵守《合同法》及相关国家法律法规。
2.由甲方向乙方提供印刷所需要的广告样本,乙方向甲方提供甲方所要求的纸张并在纸张一面印上甲方提供的广告。
3.乙方必须按双方约定的时间交货,如果超出期限,甲方有权终止协议并要求乙方赔偿甲方因此所发生的所有损失。
4.甲方应按时按双方商定的方式向乙方支付相应费用。
5. 本合同一式两份,双方各执一份,自签字盖章之日起生效。
甲 方:___________________ 乙 方:___________________
代 表:___________________ 代 表:___________________
(盖章) (盖章)
年 月 日 年 月 日
附录七 与商家合作协议书
甲方: 4a文化传媒公司
乙方:***公司
甲乙双方本着“互惠互利,共同发展”的原则,在“平等、自愿”的基础上,签定本合同,内容如下:
1.甲乙双方须共同遵守《中华人民共和国广告法》及相关国家法律法规。
2. 乙方在甲方媒体刊登广告,遵守甲方媒体的广告管理规定(刊登细则)。
3.乙方有权对整个过程做市场调查,如果甲方并未按双方商定的方式去做,乙方可以有权终止合作,并且不付甲方任何广告费用。
4.乙方可以自己提供广告方案,也可选择由甲方提供广告方案,前提是乙方向甲方支付一定酬金。
5.乙方需按时向甲方支付广告费用(具体凯发k8国际的支付方式双方商定)。
6. 本合同一式两份,双方各执一份,自签字盖章之日起生效。
甲 方:___________________ 乙 方:___________________
代 表:___________________ 代 表:___________________
(盖章) (盖章)
年 月 日 年 月 日
附 录八 广告样品(黑白)——正面(学习资料)
一、原理
考马斯亮蓝g-250(coomassie g-250)是一种甲基取代的三苯基甲烷,分子中磺酸基的蓝色染料,在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝g-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液,引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移,在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595nm处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收,因此,可大大地提高蛋白质的测定灵敏度。蛋白质—考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。利用溶液颜色的差异进行比色测定,适合于蛋白质类的定量分析,尤其适合于稀有蛋白质的微量分析。
考马斯亮蓝g-250试剂呈色反应颜色稳定、灵敏度高,最低测试蛋白质量在1ug左右。
二、操作步骤
1. 标准曲线测定法
分别取六只试管,其中一只加入1.0ml蒸馏水做空白,5只分别加入不同体积的浓度为100ug/ml牛血清清蛋白标准液,补充水到1.0ml。然后每只试管加入5.0ml考马斯亮蓝g-250试剂,摇匀放置5min,在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。以a595吸光值为纵坐标,牛血清清蛋白的ug数量为横坐标绘制标准曲线。具体操作见下表。
蛋白质标准曲线测定加样
试剂 空白 1 2 3 4 5
100ug/ml牛血清清蛋白/ml 1.0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8
牛血清清蛋白/ug 0 10 20 40 60 80
去离子水/ml 0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2
考马斯亮蓝g-250试剂/ml 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
吸光值a595
2. 蛋白样品
配制浓度约100ug/ml的待测蛋白质溶液。取一只试管加入1.0ml蒸馏水做空白,一支加入0.5ml待测蛋白质溶液,补充水到1.0ml。然后每支试管加入5.0ml考马斯亮蓝g-250试剂,摇匀放置5min后,在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。用测得的吸光值从标准曲线上查得相当于牛血清清蛋白的ug数量,计算出待测蛋白质的含量。
在标准蛋白质和蛋白质样品的测定时,为了减小误差,每一个浓度的蛋白质做3支平行管。
3.试剂配置
a.牛血清清蛋白标准液 结晶牛血清清蛋白或酪蛋白,预先经微量凯氏定氮法标定该蛋白质的百分含量或者根据牛血清清蛋白的消光系数是6.6来计算其百分含量。然后根据该蛋白的纯度配置成浓度为100 ug/ml的蛋白溶液。
b.考马斯亮蓝g-250溶于50ml95%乙醇,加入100ml质量浓度为0.85g/ml的磷酸,作为母液保存,使用时用水稀释到1000ml。试剂的最终浓度为0.01%考马斯亮蓝g-250、质量浓度为0.085g/ml磷酸。
植物体内可溶性蛋白质含量的测定 (考马斯亮蓝法和lowry法)
实验 植物体内可溶性蛋白质含量的测定
植物体内的可溶性蛋白质大多数是参与各种代谢的酶类,测其含量是了解植物体总代谢的一个重要指标。在研究每一种酶的作用时,常以比活(酶活力单位/mg蛋白)表示酶活力大小及酶制剂纯度。因此,测定植物体内可溶性蛋白质是研究酶活的一个重要项目。常用测定方法有lowry法和考马斯亮蓝g-250染料结合法。本实验将分别介绍这两种方法。
附 录九 广告样品(彩色)——正面(学习资料)
一、原理
考马斯亮蓝g-250(coomassie g-250)是一种甲基取代的三苯基甲烷,分子中磺酸基的蓝色染料,在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝g-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液,引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移,在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595nm处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收,因此,可大大地提高蛋白质的测定灵敏度。蛋白质—考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。利用溶液颜色的差异进行比色测定,适合于蛋白质类的定量分析,尤其适合于稀有蛋白质的微量分析。
考马斯亮蓝g-250试剂呈色反应颜色稳定、灵敏度高,最低测试蛋白质量在1ug左右。
二、操作步骤
1. 标准曲线测定法
分别取六只试管,其中一只加入1.0ml蒸馏水做空白,5只分别加入不同体积的浓度为100ug/ml牛血清清蛋白标准液,补充水到1.0ml。然后每只试管加入5.0ml考马斯亮蓝g-250试剂,摇匀放置5min,在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。以a595吸光值为纵坐标,牛血清清蛋白的ug数量为横坐标绘制标准曲线。具体操作见下表。
蛋白质标准曲线测定加样
试剂 空白 1 2 3 4 5
100ug/ml牛血清清蛋白/ml 1.0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8
牛血清清蛋白/ug 0 10 20 40 60 80
去离子水/ml 0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2
考马斯亮蓝g-250试剂/ml 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
吸光值a595
2. 蛋白样品
配制浓度约100ug/ml的待测蛋白质溶液。取一只试管加入1.0ml蒸馏水做空白,一支加入0.5ml待测蛋白质溶液,补充水到1.0ml。然后每支试管加入5.0ml考马斯亮蓝g-250试剂,摇匀放置5min后,在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。用测得的吸光值从标准曲线上查得相当于牛血清清蛋白的ug数量,计算出待测蛋白质的含量。
在标准蛋白质和蛋白质样品的测定时,为了减小误差,每一个浓度的蛋白质做3支平行管。
3.试剂配置
a.牛血清清蛋白标准液 结晶牛血清清蛋白或酪蛋白,预先经微量凯氏定氮法标定该蛋白质的百分含量或者根据牛血清清蛋白的消光系数是6.6来计算其百分含量。然后根据该蛋白的纯度配置成浓度为100 ug/ml的蛋白溶液。
b.考马斯亮蓝g-250溶于50ml95%乙醇,加入100ml质量浓度为0.85g/ml的磷酸,作为母液保存,使用时用水稀释到1000ml。试剂的最终浓度为0.01%考马斯亮蓝g-250、质量浓度为0.085g/ml磷酸。
植物体内可溶性蛋白质含量的测定 (考马斯亮蓝法和lowry法)
实验 植物体内可溶性蛋白质含量的测定
植物体内的可溶性蛋白质大多数是参与各种代谢的酶类,测其含量是了解植物体总代谢的一个重要指标。在研究每一种酶的作用时,常以比活(酶活力单位/mg蛋白)表示酶活力大小及酶制剂纯度。因此,测定植物体内可溶性蛋白质是研究酶活的一个重要项目。常用测定方法有lowry法和考马斯亮蓝g-250染料结合法。本实验将分别介绍这两种方法。